制备柱是气液相的关键部件，主要由两大类组成，毛细管柱和填充柱，其中毛细管柱由两部分组成：管线和固定相，管线主要有熔融石英和不锈钢两种。固定相是色谱分离的关键，它有很多种，大多数是高分子量、热稳定性好的聚合物，这些聚合物是液体或胶，常用的是聚硅氧烷和聚乙二醇，还有另外常用的固定相是小的多孔颗粒，由聚合物和沸石组成，在色谱实验过程中选择合适的产品对实验的顺利开展和实验结果的性而言是十分重要的。

 

　　今天咱们来聊一聊制备柱的选择方法：

 

　　1、填料基质

 

　　（1）硅胶基质：纯度高本钱低，强度大，化学修饰轻易，但pH值范围有限。大多硅胶基质填料在pH2-8之间稳定，但经过特殊修饰的硅胶键合相可以稳定在pH1.5-10。

 

　　（2）聚合物基质：应用pH值范围宽，温度稳定(高温可以达到80度以上)，机械强度小。

 

　　2、颗粒外形

 

　　大多现代HPLC填料都是球形颗粒，但有时是不规则的颗粒。球形颗粒提供较低的柱压、较高的柱效和稳定性以及较长的柱寿命在使用高粘度的活动相时;不规则颗粒有较大比表面积和相对低廉的价格。

 

　　3、颗粒粒径

 

　　粒径越小柱效越高、分离度越高，但同时会导致较高柱压降。选择1.5-3μm的填料以解决一些复杂样品，UPLC可以使用1.5μm的填料;另外10μm或更大粒径的填料用作半制备或制备柱。

 

　　4、含碳量

 

　　含碳量指的是硅胶表面键合相的比例，与比表面积和键合覆盖度等有关。高含碳量进步柱容量、分辨率及分析时间，用于要求高分离度的复杂样品;低含碳量分析时间短、展现不同的选择性，用于快速分析简单样品及需要高含水活动相条件的样品。一般C18的含碳量在7-19%不等。