制备柱主要应用在植物化学、药物合成、生物化学等领域的产品的提取及纯化工作中。不同的工作领域中组分的制备和纯化量的差异较大。在生物技术领域中，酶的分离是μg级；在天然产物化学和合成化学领域中，为应对未知成分定性鉴别、结构测定、生物活性测试等要求，需要纯化若干mg级的高纯物；在药品学测试中，需要g级的标准品和对照品；在工业级提纯中，目标产物工业化生产往往需要kg级的分离纯化。

 

　　下面咱们来聊一聊如何使用制备柱能保持其柱效：

 

　　1、保存时应将柱内充满乙腈或甲醇，柱接头要拧紧，防止溶剂挥发干燥。禁止将缓冲溶液留在柱内静置过夜或更长时间。

 

　　2、避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的突然变化或者使其从高处掉下都会影响柱内的填充状况；柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料，因此在调节流速时应该缓慢进行，在阀进样时阀的转动不能过缓(如前所述)。

 

　　3、使用过程中，如果压力升高，一种可能是烧结滤片被堵塞，这时应更换滤片或将其取出进行清洗；另一种可能是大分子进入柱内，使柱头被污染；如果柱效降低或色谱峰变形，则可能柱头出现塌陷，死体积增大。在后两种情况发生时，小心拧开柱接头，用洁净小钢将柱头填料取出1-2mm高度再把柱内填料整平。然后用适当溶剂湿润的固定相填满色谱柱，压平，再拧紧柱接头。这样处理后柱效能得到改善，但是很难恢复到新柱的水平。柱子失效通常是柱端部分，在分析柱前装一根与分析柱相同固定相的短柱(5-30mm)，可以起到保护、延长柱寿命的作用。采用保护柱会损失一定的柱效，这是值得的。通常色谱柱寿命在正确使用时可达2年以上。以硅胶为基质的填料，只能在pH2-9范围内使用。柱子使用一段时间后，可能有一些吸附作用强的物质保留于柱顶，特别是一些有色物质更易看清被吸着在柱顶的填料上。

 

　　4、新的产品在使用一段时间后柱顶填料可能塌陷，使柱效下降，这时也可补加填料使柱效恢复。每次工作完后，应用洗脱能力强的洗脱液冲洗，例如ODS柱宜用甲醇冲洗至基线平衡。当采用盐缓冲溶液作流动相时，使用完后应用无盐流动相冲洗。含卤族元素的化合物可能会腐蚀不锈钢管道，不宜长期与之接触。装在HPLC仪上柱子如不经常使用，应每隔4-5天开机冲洗15分钟。